联系我们Contact us
无需跑胶，无需转膜！比Western Blot更便捷、准确的Simple Western来啦！
什么是Simple Western？
它的工作原理是什么？
采用微量样品(pin)(pin)管，以一根毛细(xi)管作为(wei)载(zai)体，结合专(zhuan)利的(de)内涂层技术，可(ke)以实现在同一样品(pin)(pin)管中完成样品(pin)(pin)的(de)上样、分离、固(gu)定、免疫放大和化学(xue)检(jian)测(ce)，并自动(dong)进行数(shu)据分析(xi)，整个过程无需人工干预， 可(ke)有效提高检(jian)测(ce)结果的(de)准确性和可(ke)重(zhong)复性。
Simple Western的作用是什么？
与传统western blot 一致，都能够检测蛋(dan)白(bai)表达量。
Western Blot中文一般称(cheng)为蛋(dan)白质(zhi)印(yin)迹。它(ta)是分子生(sheng)物学、生(sheng)物化学和(he)免疫遗传学中常用的(de)一种(zhong)实验方法。其基本(ben)原理(li)是通过(guo)特(te)异性抗体对(dui)凝胶电泳处理(li)过(guo)的(de)细胞或生(sheng)物组(zu)(zu)织(zhi)(zhi)样品(pin)进行(xing)着色。通过(guo)分析(xi)着色的(de)位置和(he)着色深度获得(de)特(te)定蛋(dan)白质(zhi)在(zai)所分析(xi)的(de)细胞或组(zu)(zu)织(zhi)(zhi)中的(de)表(biao)达情况的(de)信息。
与传统western blot相比，
Simple Western有哪些优点？
实验流程标准化、自动化
Simple Western 技术可实现所有检测步(bu)骤的(de)自动化，包括蛋白分离(li)、固定、免疫印迹、洗涤(di)、检测及(ji)数据(ju)分析等。可避(bi)免传统(tong)方法因实验(yan)步(bu)骤繁多(duo)、检测流程较长而(er)最(zui)常导(dao)致的(de)结果重(zhong)复性差问题。
上样量小于传统western blot，节约珍贵样品
由于采用了毛细管电泳微缩技术，单个样品上样体积只需 3~5 μL，浓度 0.1~4 μg/μL，因此可尝试数目有限的流式分选细胞、干细胞、珍稀的临床组织等等，而传统 WB 往往需要 20~100 μg 总蛋白。因此，上述珍稀样品往往不足以进行蛋白水平的实验，导致中心法则证据不完整。
蛋白分子量检测范围宽
2~440 kDa；由于蛋(dan)白固定机理(li)与(yu)传(chuan)统 WB 不(bu)同，因此 Simple Western 可(ke)检测(ce)高达几百 KDa 的大分子量蛋(dan)白，不(bu)需再摸索任何转(zhuan)膜条件；而在传(chuan)统 WB 操作中，大分子量蛋(dan)白转(zhuan)膜效(xiao)率极(ji)其低下，甚至完全无(wu)法转(zhuan)印。
数据分析标准化、自动化
软件(jian)将自动给出(chu)蛋白的(de)表达丰度等(deng)(deng)数(shu)字信(xin)(xin)息，不(bu)需进(jin)行人工灰度分析， 数(shu)据分析不(bu)受传(chuan)统 WB 条带(dai)形(xing)(xing)状、背景信(xin)(xin)号等(deng)(deng)干扰，避免主观倾向，更易被(bei)杂(za)志(zhi)认可(ke)；数(shu)字化定量(liang)数(shu)据亦(yi)可(ke)直接方便(bian)进(jin)行条形(xing)(xing)图绘制、T 检(jian)验、方差分析等(deng)(deng)统计实现。
条带图片漂亮规则，更易发表
Simple Western 技术将底层物理发光信号光斑转换成正态分布峰图，进而根据峰图输出规则美观的条带。传统 WB 中经常出现的(de)哑铃(ling)条带(dai)(dai)(dai)、微笑条带(dai)(dai)(dai)、过曝空斑(ban)、背(bei)景(jing)噪(zao)点等问题，这不仅影响(xiang)条带(dai)(dai)(dai)美观度(du)，在(zai)条带(dai)(dai)(dai)圈选定量、背(bei)景(jing)扣除时也将(jiang)引入很大的(de)偏差(cha)，为(wei)了得到一(yi)张可发表(biao)的(de)实验图(tu)片， 往(wang)往(wang)需(xu)要进行(xing) n 多次重复实验。Simple Western 技术不仅保留了生物学(xue)意义(yi)上的(de)表(biao)达关(guan)系，条带(dai)(dai)(dai)呈(cheng)现形式也更(geng)加赏(shang)心悦目，结(jie)果(guo)更(geng)易被杂志接收(shou)。
样本通道完全独立，样本通道可自由组合、自由排列
各样本通道完全独立，在同一轮检测实验中，每个样本通道中可以各自检测不同种类的蛋白质，即每个样本通道中均可以各自使用不同抗体孵育，各样本通道间互不干扰；每根毛细管对应一个泳道，由于毛细管彼此独立，因此获得原始实验数据之后，可进一步将不同泳道进行排列组合，从不同角度阐释实验数据，一次实验可获得多张实验图片，从而避免了重复实验。
利用(yong)该仪器(qi)获得的数据已经在多个期刊(kan)发(fa)表 (Boyer et al. 2018; Xu et al. 2022)。
做Simple Western 送样有哪些要求吗？
组织(zhi) (>100 mg)：取样(yang)后样(yang)品立即在液氮中(zhong)速冻5min，放置在-80℃保存，送(song)样(yang)时请(qing)在干冰(bing)中(zhong)运(yun)(yun)输，如果市(shi)内可以使用冰(bing)袋运(yun)(yun)输；
蛋白质溶液: 请(qing)在干冰中运输；
细胞 (>106): 请(qing)用冰(bing)袋维持在4℃运输。
