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1. 基本信(xin)息
品系名称：NOD-B2Mem1vst Prkdcscid Il2rgtm1vst/Vst
常(chang)用(yong)名：NPG B2M; NPG-B2M KO; NOD-scid gamma B2M
背景：NOD-scid /NcrCrl
毛色: 白色
品系建立:
采用CRISPR-CAS9技(ji)术将NPG小鼠的(de)MHC class I 分子B2M (beta-2 microglobulin)基因2号外(wai)显子及附近内含子删除了674bp，获得B2M 基因敲除的(de)NPG小鼠。
经过(guo)PBMC移植(zhi)实(shi)验，证明该小鼠比NPG小鼠晚(wan)发生GVHD（体重(zhong)、活动能(neng)力(li)、姿势、毛发和皮(pi)肤完整性等），可以用(yong)于外周血人(ren)源(yuan)化和Hu-NPG B2m-CDX/PDX小鼠药效(xiao)学(xue)实(shi)验。
2. 表型分析
B2M基因编码的β2 microglobulin是MHC I类分子的亚基。MHC I类分子介导的T细胞反应在异种排斥反应中起到重要作用。B2M基因敲除后，小鼠细胞表面不再表达MHC I类分子，人PBMC移植后发生的人源免疫细胞攻击小鼠细胞的移植物抗宿主病（GVHD）被显著减弱，GVHD发生的时间从移植后平均3-4周延迟到平均6-8周。使用NPG B2m小鼠建立PBMC人源化小鼠模型可以比NPG小鼠的PBMC模型获得更长的实验窗口期，因而是一种更理想的人源化小鼠模型，在肿瘤免疫研究中具有重要应用价值。
（1）Hu-NPG B2m小鼠同(tong)NPG小鼠类似，可以(yi)实现人外周血的高水平(ping)重建。
图1 使(shi)用8只(zhi)NPG B2m小(xiao)鼠(shu)和8只(zhi)NPG小(xiao)鼠(shu)移植5*106 PBMC细胞，每(mei)周(zhou)外周(zhou)血中人的(de)CD45+阳性(xing)细胞的(de)百分比流式分析结果(guo)，NPG B2m小(xiao)鼠(shu)比NPG小(xiao)鼠(shu)重(zhong)建的(de)速(su)度和水(shui)平都缓(huan)慢一些，可能是延(yan)缓(huan)GVHD发生的(de)一个重(zhong)要指(zhi)标。
（2）NPG B2m与NPG小(xiao)鼠相比，移植PBMC细胞后可以延缓GVHD的(de)发(fa)生。
图2 NPG B2M（B2M）与(yu)NPG格3只(zhi)小(xiao)鼠(shu)，分别(bie)移植5*106 人PBMC细胞，6只(zhi)小(xiao)鼠(shu)的(de)体重变化曲线，可见B2M体重可以(yi)维(wei)持2~3个(ge)月；与(yu)NPG小(xiao)鼠(shu)相比，延缓了(le)GVHD的(de)发(fa)生。
图3 左图为B2M小鼠,移植PBMC后5w未发生GVHD ；右(you)图为NPG小鼠，移植PBMC后5w出现(xian)GVHD。
（3）Hu-NPG B2M- CDX(HCC827)小鼠(shu)药效学实(shi)验(yan)(Data from Crownbio )。
图4 使用NPG和NPG B2M小鼠，各5只，成功建立人源(yuan)化PBMC的(de)人非(fei)小细胞(bao)肺癌细胞(bao) CDX模(mo)型。
图5 使(shi)用NPG和NPG B2M小(xiao)鼠(shu)，各5只，成功(gong)建(jian)立人源化PBMC的(de)人非小(xiao)细(xi)(xi)胞(bao)肺癌(ai)细(xi)(xi)胞(bao) CDX模(mo)型，两(liang)种模(mo)型的(de)存活曲线(xian)，可见(jian)Hu-PBMC-NPG B2M-CDX与Hu-PBMC-NPG-CDX小(xiao)鼠(shu)相(xiang)比，明显的(de)延缓(huan)了(le)GVHD和死亡的(de)发生(sheng)。
3. 应用领域(yu)
-异源移(yi)植GVHD体(ti)内机理研究(jiu)
-Hu-NPG.B2M-PDX小鼠药效学实验(yan)，如(ru)肿瘤免疫抗体药物、Car-T的药效研究等(deng)
-新的人源化动物模型研发
4. 参考文献
(1)King MA; Covassin L; Brehm MA; Racki W; Pearson T; Leif J; Laning J; Fodor W; Foreman O; Burzenski L; Chase TH; Gott B; Rossini AA; Bortell R; Shultz LD; Greiner DL. 2009.
(2)Human peripheral blood leucocyte non-obese diabetic-severe combined immunodeficiency interleukin-2 receptor gamma chain gene mouse model of xenogeneic graft-versus-host-like disease and the role of host major histocompatibility complex. Clin Exp Immunol 157(1):104-18.
