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1.基本信息
品系名称：CB6F1-Tg (HRAS)9/Vst
常(chang)用(yong)名(ming)：rasH小鼠
背景：BALB/cAnNCrl*C57BL/6NCrl
毛(mao)色：黑(hei)色
鉴定方法：Standard PCR
2.品系建立
维通(tong)达rasH小鼠(shu)是rasH2转基(ji)因小鼠(shu)的(de)替代模型(xing)之一。rasH2转基(ji)因鼠(shu)是由日本CIEA研制，通过(guo)原核注射使小鼠全身过表达(da)人HRAS基因获得，该小鼠模型广泛用于药物安评中(zhong)的致瘤性(xing)评价试验。其自发肿瘤率(lv)并不(bu)高(gao)，在(zai)出生的6个月内很少(shao)出现肿瘤(liu)或(huo)癌前细胞增生(sheng)，但(dan)表现出对(dui)基因毒性(xing)化(hua)合物及非基因毒性(xing)化(hua)合物的致瘤(liu)敏感性(xing)增强(qiang)，在受(shou)到致(zhi)癌物诱(you)导时可在(zai)较短(duan)时间内(nei)高发肿(zhong)瘤(liu)。1990年代，被(bei)美(mei)国FDA批准用于药物(wu)安全性(xing)评价中的致瘤性(xing)试(shi)验，用为期(qi)半年的实验代替原规(gui)定(ding)的为期(qi)两年的普通啮齿(chi)类动物(wu)致瘤性(xing)试(shi)验。
维通达(da)构建了(le)包含人(ren)HRAS基(ji)(ji)因(yin)(yin)的编码序(xu)列、内含子(zi)以(yi)及上(shang)下游非编码区的染色(se)(se)体(ti)DNA片段(duan)(duan)(duan)的转(zhuan)(zhuan)基(ji)(ji)因(yin)(yin)载体(ti)，获得目(mu)的片段(duan)(duan)(duan)DNA全(quan)长约为7.6 Kb，并在其(qi)最末(mo)一个内含子(zi)的序(xu)列中(zhong)引入(ru)一个点突变(bian)(bian)（据报道该突变(bian)(bian)可(ke)增强HRAS基(ji)(ji)因(yin)(yin)表(biao)达(da)），使其(qi)可(ke)以(yi)在HRAS基(ji)(ji)因(yin)(yin)自身调控序(xu)列的驱动下表(biao)达(da)）。将(jiang)转(zhuan)(zhuan)基(ji)(ji)因(yin)(yin)片段(duan)(duan)(duan)注射到C57BL/6N小鼠(shu)(shu)(shu)受(shou)精卵原核内，获得转(zhuan)(zhuan)基(ji)(ji)因(yin)(yin)阳性(xing)首建鼠(shu)(shu)(shu)，分(fen)别扩繁建系，进行表(biao)型(xing)分(fen)析(xi)，从中(zhong)筛选符(fu)合致瘤性(xing)试验(yan)的第(di)9个系予以(yi)保留。用数字定量(liang)PCR法确定，该系单位点串联转(zhuan)(zhuan)基(ji)(ji)因(yin)(yin)拷贝(bei)数4个，用染色(se)(se)体(ti)步移法确定转(zhuan)(zhuan)基(ji)(ji)因(yin)(yin)串联片段(duan)(duan)(duan)，整合于小鼠(shu)(shu)(shu)第(di)6号染色(se)(se)体(ti)上(shang)。利(li)用Western blot检测小鼠(shu)(shu)(shu)各器官组织转(zhuan)(zhuan)基(ji)(ji)因(yin)(yin)表(biao)达(da)情况，结果表(biao)明HRAS在小鼠(shu)(shu)(shu)前胃(wei)和肺脏中(zhong)具有较高(gao)的表(biao)达(da)量(liang)。
3.繁育信息
交配方式(shi)：阳性（杂合）配野生
日(ri)粮信息：SPF 繁殖鼠粮
平均产子(zi)数（只）：6
繁育周(zhou)期(周(zhou))：36
4.rasH小(xiao)鼠的致(zhi)瘤敏感(gan)性
1.rasH小(xiao)鼠在6月龄(ling)前极少(shao)自发肿(zhong)(zhong)瘤(liu)。在12月龄(ling)时约有10%~20%死于自发肿(zhong)(zhong)瘤(liu)。
2.当(dang)用Urethane 50mg/kg ip.tiw诱导时，在6个月内70%以上小(xiao)鼠发现肺部肿(zhong)(zhong)瘤，也有部分有肝脏肿(zhong)(zhong)瘤、肉瘤等。
肉瘤及其病理切片，40X倍(bei)
3.rasH小(xiao)鼠应用(yong)于污水的致瘤(liu)(liu)性实(shi)验。使(shi)用(yong)甲基亚硝基脲(niao)作(zuo)为阳性对(dui)照，在三个月时观察到(dao)小(xiao)鼠胃部有实(shi)体瘤(liu)(liu)产生。污水灌胃使(shi)rasH小(xiao)鼠在胃部能(neng)够形成明显的肿瘤(liu)(liu)，也在乳腺(xian)观察到(dao)肿瘤(liu)(liu)。
