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1. 基(ji)本信息
品系(xi)名称(cheng)：NOD. Prkdcscid Il2rgtm1 VstTg(Csf1p –IL2)Vst/Vst
常(chang)用名(ming)：hIL2-NPG /Vst; NPG.hIL-2
背景(jing) ：NOD-scid/NcrCrl
毛色：白色
品系建(jian)立(li)：将(jiang)mouse CSF1-promoter与人Interleukn-2（IL-2）基因(yin)(yin)的(de)CDS序列(lie)相(xiang)连(lian)接，构建(jian)pcDNA3.1-CSF1P-IL2转基因(yin)(yin)载(zai)体质粒(li)，扩增(zeng)、抽提、去内毒素后，使用Hind3+Stu1双酶切线性化(hua)(hua)，回收(shou)3.1Kb目的(de)片段进行胚胎显(xian)微注射，注射到NPG小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)受精(jing)卵(luan)的(de)原核(he)中(zhong)。在获得的(de)子代中(zhong)筛(shai)选合适(shi)表(biao)达量的(de)阳(yang)性小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)。在隔离器中(zhong)，按照转基因(yin)(yin)阳(yang)性鼠(shu)配(pei)NPG小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)的(de)方式扩繁，建(jian)立(li)商品化(hua)(hua)hIL2-NPG小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)品系。
2.hIL-2 NPG表型(xing)特征
在(zai)(zai)NPG小(xiao)鼠(shu)(shu)中(zhong)表(biao)达人(ren)的(de)IL-2细(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)因(yin)子。IL-2 是(shi)一种介导白(bai)细(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)之间相互作用(yong)的(de)细(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)因(yin)子，起先(xian)被称为(wei)T细(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)生长因(yin)子，可刺激T细(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)、NK细(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)、B细(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)增殖并加强(qiang)它(ta)们(men)的(de)功能。由于(yu)小(xiao)鼠(shu)(shu)的(de)IL-2与人(ren)的(de)IL-2存在(zai)(zai)种属差异，而且在(zai)(zai)NPG这样的(de)免(mian)疫(yi)缺陷(xian)小(xiao)鼠(shu)(shu)中(zhong)IL-2的(de)分泌本来就减弱，所以在(zai)(zai)造血干细(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)移(yi)(yi)植或(huo)免(mian)疫(yi)细(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)移(yi)(yi)植建立(li)的(de)人(ren)源(yuan)化免(mian)疫(yi)系统小(xiao)鼠(shu)(shu)中(zhong)缺乏IL-2刺激信(xin)号，致使依赖IL-2因(yin)子的(de)细(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，尤(you)其(qi)是(shi)NK细(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)分化发(fa)育和(he)功能发(fa)挥受到(dao)影响。表(biao)达人(ren)IL-2的(de)NPG小(xiao)鼠(shu)(shu)可以促进人(ren)源(yuan)化免(mian)疫(yi)系统小(xiao)鼠(shu)(shu)T细(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)、NK细(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)分化发(fa)育，增强(qiang)其(qi)功能。
hIL2-NPG小鼠的外(wai)周(zhou)血(xue)中(zhong)，ELISA检测(ce)人IL-2在血(xue)清(qing)里的含量为40~70pg/ml。
以下(xia)是hIL2-NPG小(xiao)鼠移(yi)植脐带血分(fen)离的CD34阳性造血干细(xi)胞之后主要人(ren)源免疫细(xi)胞的重建的一个实例。
▲在(zai)hIL2-NPG小鼠上移(yi)植CD34+造血干细胞(bao)4周(zhou)后(hou)，小鼠外(wai)周(zhou)血中人(ren)源CD45阳性细胞(bao)的(de)比(bi)例(li)可以达(da)到较(jiao)高(gao)水平(ping)（均值达(da)40%以上）。在(zai)人(ren)源CD45阳性细胞(bao)中，CD56阳性的(de)NK细胞(bao)所占比(bi)例(li)较(jiao)高(gao)，并在(zai)移(yi)植8周(zhou)之(zhi)后(hou)稳定维持高(gao)水平(ping)重建(jian)。
IL-2除了(le)促进(jin)NK细胞的分化发(fa)育(yu)，对T细胞的发(fa)育(yu)也有较强的促进(jin)作用。但是由于T细胞分化发(fa)育(yu)较晚(wan)，在HSC移(yi)植(zhi)(zhi)12周时CD3阳性T细胞仍处在较低水平。因此(ci)，HSC移(yi)植(zhi)(zhi)的hIL2-NPG小鼠模型(xing)(xing)有约两个月的以(yi)人源NK细胞为(wei)主的窗口期(qi)（移(yi)植(zhi)(zhi)后4-12周）。此(ci)模型(xing)(xing)可以(yi)作为(wei)体(ti)内研(yan)究NK功能以(yi)及通(tong)过NK细胞功能发(fa)挥抗肿瘤、抗病毒(du)作用（如ADCC作用）药效评价的理想模型(xing)(xing)。
除应(ying)用(yong)于CD34+造血干细(xi)(xi)胞移(yi)植(zhi)外，hIL2-NPG小(xiao)鼠也支持(chi)从(cong)成(cheng)体(ti)PBMC分离的(de)NK细(xi)(xi)胞的(de)移(yi)植(zhi)。经(jing)数据验(yan)证，纯化的(de)NK细(xi)(xi)胞可(ke)在此(ci)小(xiao)鼠上稳定维持(chi)及增殖。
