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1.基(ji)本信息
品系名称 | NOD-(H2D H2K)em1 Prkdcscid Il2rgtm1 /Vst |
常用名 | NPG-H2D*H2K KO；NPG.H2D-H2K-；NPG-(KD)null |
来源 | 北(bei)京(jing)维通达生物技(ji)术有限公司 |
背景(jing) | NOD SCID/NcrCrl |
毛色 | 白色 |
鉴定方法 | Standard PCR |
品(pin)系建立：采用(yong)CRISPR-CAS9技术(shu)将NPG小(xiao)鼠(shu)(shu)17号染色体(ti)的(de)H2D和(he)(he)H2K基(ji)因全部(bu)删除，获得KD双基(ji)因敲(qiao)除的(de)首(shou)建鼠(shu)(shu)。 NPG-(KD)null纯(chun)合(he)敲(qiao)除小(xiao)鼠(shu)(shu)缺失小(xiao)鼠(shu)(shu)缺乏(fa)小(xiao)鼠(shu)(shu)主要组织相容(rong)性复(fu)合(he)体(ti)(MHC) I类分子(zi)，并在人外周血单(dan)个(ge)核细胞(PBMC)移植(zhi)(zhi)后表(biao)现出减少异种移植(zhi)(zhi)物抗宿(su)主病反应(ying)(xeno-GVHD)。经过PBMC移植(zhi)(zhi)实验(yan)(yan)，证明(ming)该小(xiao)鼠(shu)(shu)比NPG小(xiao)鼠(shu)(shu)晚(wan)发生GVHD（体(ti)重、活动能力(li)、姿(zi)势、毛发和(he)(he)皮肤(fu)完整性等），可以用(yong)于外周血人源(yuan)化(hua)和(he)(he)Hu-NPG (KD)null-CDX/PDX小(xiao)鼠(shu)(shu)药(yao)效学实验(yan)(yan)。
2.繁育信息
交配方式：纯(chun)(chun)合*纯(chun)(chun)合；隔离器生产
日粮信息：SPF 繁(fan)殖鼠(shu)粮
3.表型与(yu)应(ying)用
H2D和H2K基因(yin)都位(wei)于小(xiao)鼠(shu)的(de)(de)(de)17号染色体，是(shi)(shi)MHC I类(lei)分(fen)子(zi)。NPG小(xiao)鼠(shu)移植人(ren)PBMC或分(fen)离的(de)(de)(de)T细胞等免(mian)疫细胞后会发生移植物抗(kang)宿(su)主病（GvHD），严(yan)重(zhong)的(de)(de)(de)情(qing)况下造成小(xiao)鼠(shu)在数周内死亡。考(kao)虑到GvHD主要(yao)由(you)MHC I类(lei)、II类(lei)分(fen)子(zi)介导，而且I类(lei)分(fen)子(zi)表(biao)达(da)(da)更广泛，起主要(yao)介导作用(yong)，因(yin)此敲(qiao)除(chu)(chu)I类(lei)分(fen)子(zi)可以(yi)减缓GvHD的(de)(de)(de)发生。MHC I类(lei)分(fen)子(zi)由(you)α、β两个(ge)亚(ya)(ya)基组(zu)成，敲(qiao)除(chu)(chu)任一(yi)个(ge)亚(ya)(ya)基都使I类(lei)分(fen)子(zi)不再(zai)表(biao)达(da)(da)。小(xiao)鼠(shu)的(de)(de)(de)β2-微(wei)球蛋白（由(you)B2M基因(yin)编(bian)码）是(shi)(shi)MHC I类(lei)分(fen)子(zi)的(de)(de)(de)β亚(ya)(ya)基，敲(qiao)除(chu)(chu)之(zhi)(zhi)(zhi)后I类(lei)分(fen)子(zi)不再(zai)表(biao)达(da)(da)，小(xiao)鼠(shu)移植PBMC之(zhi)(zhi)(zhi)后GvHD的(de)(de)(de)发生明显减缓。但是(shi)(shi)β2-微(wei)球蛋白同时还是(shi)(shi)抗(kang)体IgG的(de)(de)(de)受体FcRn的(de)(de)(de)亚(ya)(ya)基，FcRn负责抗(kang)体的(de)(de)(de)内吞-再(zai)循(xun)环，与抗(kang)体在血液中的(de)(de)(de)半衰期有关(guan)，B2M敲(qiao)除(chu)(chu)之(zhi)(zhi)(zhi)后抗(kang)体的(de)(de)(de)半衰期变(bian)短，因(yin)此B2M敲(qiao)除(chu)(chu)鼠(shu)不适合作为评价抗(kang)体药的(de)(de)(de)模(mo)型。NPG小(xiao)鼠(shu)MHC I类(lei)分(fen)子(zi)的(de)(de)(de)α亚(ya)(ya)基有两种(zhong)：H2K和H2D。这两个(ge)基因(yin)敲(qiao)除(chu)(chu)之(zhi)(zhi)(zhi)后MHC I类(lei)分(fen)子(zi)就不在表(biao)达(da)(da)。使用(yong)NPG-(KD)null小(xiao)鼠(shu)建(jian)立PBMC人(ren)源化(hua)小(xiao)鼠(shu)模(mo)型可以(yi)比NPG小(xiao)鼠(shu)的(de)(de)(de)PBMC模(mo)型获得更长的(de)(de)(de)实验窗口期，因(yin)而是(shi)(shi)一(yi)种(zhong)更理想的(de)(de)(de)人(ren)源化(hua)小(xiao)鼠(shu)模(mo)型，在肿瘤(liu)免(mian)疫研究中具(ju)有重(zhong)要(yao)应用(yong)价值(zhi)。
3.1.流式细胞分析(xi)小鼠MHC I类分子(zi)（H2KD）的表达
3.2.人PBMC（5*106 cells/mouse）移植后，两种(zhong)小鼠(shu)外(wai)周血(xue)中hCD45+细(xi)胞(bao)的比例流式(shi)细(xi)胞(bao)分析结(jie)果(guo)
3.3人(ren)PBMC（5*106 cells/mouse）移植(zhi)后，两种小鼠(shu)体重变化
3.4.人PBMC（5*106 cells/mouse）移植(zhi)后，两种小鼠(shu)的GvHD临床评分(fen)
4.应用领域(yu)
异源移植GVHD体内机理研究
Hu-NPG-(KD)null-PDX小鼠药(yao)效学实验(yan)，如肿(zhong)瘤免疫抗体药(yao)物、Car-T的药(yao)效研究等。
新的人源化动物模型研发
参(can)考文献
Covassin L, Jangalwe S, Jouvet N, Laning J, Burzenski L, Shultz LD, Brehm MA. Human immune system development and survival of non-obese diabetic (NOD)-scid IL2rγ(null) (NSG) mice engrafted with human thymus and autologous haematopoietic stem cells. Clin Exp Immunol. 2013 Dec;174(3):372-88.
