联系我们Contact us
1. 基(ji)本信息
品系名称：B6-Pdcd1em1(hPdcd1)Vst/Vst
常用名：C57BL/6-PD-1人源化小鼠; PD-1人源化小鼠
背景：C57BL/6NCrl
毛色：黑色
品系建立：
采用CRISPR-Cas9辅(fu)助的(de)方法(fa)，将小鼠程序性死亡受体(ti)1基因(yin)（Pdcd1 or PD-1，programmed death 1)）的(de)胞外(wai)区替换(huan)为人源的(de)序列。这样在PD-1人源化小鼠体(ti)内(nei)，使用人源PD-1抗体(ti)抑制剂时就可(ke)以识别，进(jin)行相(xiang)关的(de)药(yao)效(xiao)或药(yao)物筛选实验。
图1 PD-1人(ren)源化打靶策略示(shi)意图，将C57BL/6N小鼠(shu)的(de)PD-1胞外区替换(huan)为人(ren)源的(de)序列。
2. 表型(xing)分析
（1）FACS检测(ce)PD-1人源化小鼠脾(pi)脏和胸腺淋巴细胞(bao)表达hPD-1。
图2 流(liu)式(shi)分(fen)析人PD-1在脾脏和(he)胸腺(xian)淋巴(ba)细(xi)胞的表(biao)达(da)(da)情况。结果(guo)C57BL/6N野生(sheng)小(xiao)鼠(shu)基本检(jian)测不到表(biao)达(da)(da)，hPD-1小(xiao)鼠(shu)，特别是共刺激后（costimulation）hPD-1小(xiao)鼠(shu)的脾脏和(he)胸腺(xian)淋巴(ba)细(xi)胞可以(yi)检(jian)测到表(biao)达(da)(da)。
（2）体内(nei)药效验(yan)证(zheng)
将PD-1人源(yuan)化小(xiao)鼠(shu)皮下接种(zhong)小(xiao)鼠(shu)MC38结肠癌细胞(bao)系，将动物随机分成2组(zu)（n=6，雌雄(xiong)各半）,对照组(zu)注(zhu)射(she)生理盐(yan)水，实验(yan)(yan)组(zu)注(zhu)射(she)Keytruda，每(mei)周给(ji)药2次，连续给(ji)药6次。结果(guo)显示，雌性和雄(xiong)性PD-1人源(yuan)化小(xiao)鼠(shu)均(jun)为理想的体内药效(xiao)试验(yan)(yan)模(mo)型(xing)，Keytruda均(jun)表现出明(ming)显的抑瘤效(xiao)果(guo)。
;
图3 PD-1人源化小鼠(shu)模(mo)型(xing)(xing)可(ke)以成功(gong)应用于抗PD-1人源化抗体效果(guo)的(de)评价。阳性(xing)药(yao)物Keytruda在(zai)人源化PD-1小鼠(shu)上表现出(chu)明显的(de)抑瘤效果(guo)，而(er)且不(bu)存在(zai)性(xing)别(bie)差(cha)异（雌性(xing)和雄性(xing)PD-1人源化小鼠(shu)），均为理想的(de)体内药(yao)效试验模(mo)型(xing)(xing)。
3. 应用领域
PD-1是一种重要的免疫抑制分子(zi)，为CD28超(chao)家族(zu)成(cheng)员。维通达研发的PD-1人源化小(xiao)(xiao)鼠，接种MC38肿(zhong)瘤(liu)细(xi)胞(bao)系后，注射PD-1抑制剂Keytruda后，表现出明显的肿(zhong)瘤(liu)缩小(xiao)(xiao)和消(xiao)失，可(ke)以用(yong)于PD-1相关的药(yao)效或药(yao)物筛选实验。
另(ling)外对(dui)以PD-1为靶点(dian)的免疫调节对(dui)抗(kang)(kang)肿(zhong)瘤、抗(kang)(kang)感染、抗(kang)(kang)自身(shen)免疫性疾病及(ji)器官移植存活等均有重(zhong)要的意义。
4. 参考文献
（1）Shinohara T, Taniwaki M, Ishida Y, Kawaichi M, Honjo T (October 1994). "Structure and chromosomal localization of the human PD-1 gene (PDCD1)". Genomics. 23 (3): 704–6.
