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多种原因(yin)可以(yi)造(zao)成大小鼠(shu)繁育出现障碍，如(ru)由于(yu)老龄化造(zao)成精子活(huo)力的(de)降低，或由于(yu)疾病(bing)或意外造(zao)成繁育期动(dong)物生(sheng)命垂危(wei)，这时可以(yi)通(tong)过(guo)维通(tong)达提供的(de)辅(fu)助生(sheng)殖技术(shu)进行(xing)动(dong)物品系的(de)恢复。
可以将冻精复苏后，或(huo)者新(xin)鲜精液输送(song)到发(fa)情(qing)期大(da)小(xiao)鼠子宫的技术。操作比较(jiao)简单(dan)，缺点(dian)是需要精子的量比较(jiao)大(da)。
体(ti)(ti)外(wai)(wai)受(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)（In Vitro Fertilization，IVF）是(shi)指哺乳动物的(de)(de)(de)(de)(de)(de)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)和(he)(he)(he)卵(luan)(luan)子(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)在体(ti)(ti)外(wai)(wai)完成受(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)过程(cheng)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)技术(shu)。小(xiao)鼠(shu)体(ti)(ti)外(wai)(wai)受(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)技术(shu)可(ke)以分(fen)为冷冻精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)体(ti)(ti)外(wai)(wai)受(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)和(he)(he)(he)新鲜分(fen)离精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)体(ti)(ti)外(wai)(wai)受(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)。在小(xiao)鼠(shu)体(ti)(ti)外(wai)(wai)受(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)技术(shu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)发展中，有3个技术(shu)优化特别重要，显著提(ti)高(gao)(gao)了小(xiao)鼠(shu)体(ti)(ti)外(wai)(wai)受(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)成功率。（1）添加(jia)环状糊精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)（MBCD）提(ti)高(gao)(gao)了精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)获(huo)能(neng)(neng)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)效率，超活化（鞭打运动）精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)比(bi)例增加(jia)，从而(er)提(ti)高(gao)(gao)IVF的(de)(de)(de)(de)(de)(de)效率。获(huo)能(neng)(neng)后(hou)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)才具(ju)有受(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)能(neng)(neng)力(li)，研究表明牛(niu)血清(qing)蛋白(bai)（BSA）、牛(niu)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)浆蛋白(bai)（BSP）、高(gao)(gao)密度(du)脂(zhi)蛋白(bai)（HDL）和(he)(he)(he)MBCD等会促使(shi)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)膜上胆固(gu)醇流失，诱(you)导精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)获(huo)能(neng)(neng)。MBCD增加(jia)蛋白(bai)质酪氨酸磷酸化的(de)(de)(de)(de)(de)(de)能(neng)(neng)力(li)，与胆固(gu)醇强烈结合，破坏脂(zhi)筏(fa)（lipid rafts），从而(er)实现高(gao)(gao)比(bi)例的(de)(de)(de)(de)(de)(de)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)获(huo)能(neng)(neng)。（2）精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)和(he)(he)(he)卵(luan)(luan)子(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)IVF过程(cheng)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)优化，①高(gao)(gao)钙(2.04mM提(ti)高(gao)(gao)到5.09mM)、添加(jia)Reduced glutathione (GSH)和(he)(he)(he)不含脂(zhi)肪酸的(de)(de)(de)(de)(de)(de)BSA-HTF受(shou)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)液；②合适的(de)(de)(de)(de)(de)(de)卵(luan)(luan)母细(xi)胞采(cai)集时间(jian)，包括超数排卵(luan)(luan)和(he)(he)(he)体(ti)(ti)外(wai)(wai)采(cai)集卵(luan)(luan)母细(xi)胞的(de)(de)(de)(de)(de)(de)时间(jian)。（3）精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)冻存的(de)(de)(de)(de)(de)(de)优化，经典的(de)(de)(de)(de)(de)(de)方法是(shi)1990年报道的(de)(de)(de)(de)(de)(de)R18S3的(de)(de)(de)(de)(de)(de)方法（18%的(de)(de)(de)(de)(de)(de)棉子(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)糖+3%脱脂(zhi)乳）。在2010年Takeo和(he)(he)(he)Nakagata教授报道添加(jia)l-glutamine可(ke)以精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)冷冻复(fu)苏效率（小(xiao)鼠(shu)精(jing)(jing)(jing)(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)(zi)冻存复(fu)苏和(he)(he)(he)IVF的(de)(de)(de)(de)(de)(de)发展历(li)史(shi)，见下图。摘至Cryobiology, 2018, doi: 10.1016/j.cryobiol.2018.04.008.）。
目前小(xiao)鼠(shu)体外受精技术(shu)基本是(shi)从上面三个方面进行优化(hua)，维通达(da)公司在以上技术(shu)的基础上，优化(hua)了成功(gong)率。
当精子(zi)(zi)失去(qu)运动能力时(shi)，维通(tong)达采用单(dan)精胞(bao)质内(nei)注(zhu)(zhu)射(she)(she)进行品系(xi)的(de)恢复。单(dan)精子(zi)(zi)卵胞(bao)浆(jiang)显微(wei)注(zhu)(zhu)射(she)(she)（ICSI）是使(shi)用显微(wei)操作技(ji)术将精子(zi)(zi)注(zhu)(zhu)射(she)(she)到卵细胞(bao)胞(bao)浆(jiang)内(nei)，使(shi)卵子(zi)(zi)受精，体外培养(yang)到早期(qi)胚胎，再放回母体子(zi)(zi)宫内(nei)发育着床。小鼠的(de)单(dan)精子(zi)(zi)注(zhu)(zhu)射(she)(she)技(ji)术比较成熟，基本采用piezo辅助的(de)技(ji)术，将部分断尾的(de)精子(zi)(zi)头注(zhu)(zhu)射(she)(she)到MII期(qi)的(de)卵细胞(bao)胞(bao)浆(jiang)内(nei)。
尽管ICSI技(ji)术需要(yao)(yao)的(de)(de)精(jing)子数量少，对精(jing)子活力(li)没有要(yao)(yao)求，但尽量还是要(yao)(yao)选择来源和保存(cun)(cun)方法明确(que)的(de)(de)精(jing)子，至少确(que)保精(jing)子DNA的(de)(de)完(wan)整性，这样ICSI获得的(de)(de)小(xiao)(xiao)鼠胚胎才可能发育成存(cun)(cun)活的(de)(de)小(xiao)(xiao)鼠。
若雌性动(dong)物(wu)意外死亡(wang)，或者客户有按照标(biao)准程序冻存的(de)卵巢(chao)(chao)小组(zu)织块时，维通达(da)提供(gong)卵巢(chao)(chao)移植的(de)方法恢复小鼠(shu)或大鼠(shu)品系。
辅助生(sheng)殖技术(shu)是确保模(mo)型小(xiao)鼠(shu)满足CRO、科研和(he)生(sheng)产需要的基本(ben)技术(shu)，可以(yi)解决小(xiao)鼠(shu)准备和(he)扩繁过程中遇到(dao)的各种问题。辅助生(sheng)殖技术(shu)在大小(xiao)鼠(shu)模(mo)型领域的应用(yong)主(zhu)要包(bao)括：
快速扩繁，一代可以(yi)获得大量小鼠；
可(ke)以(yi)同(tong)一天(tian)移植大量胚胎，得到大批(pi)量同(tong)日龄小鼠；
小鼠丧失交配(pei)能力，或(huo)者不育；
雄鼠数量少，需要快速(su)扩群；
出现微生物(wu)污(wu)染，需要净化；
冷冻精子，需要恢复成小鼠；
获得大量胚胎(tai)，用于(yu)冻(dong)存、显微注射或者其他(ta)试验研(yan)究；
受精机理的研究
另外(wai)，维通达可以协助(zhu)客户进行(xing)辅助(zhu)生(sheng)殖技术的(de)研发(fa)。通过模拟(ni)体(ti)内受精(jing)(jing)(jing)(jing)和发(fa)育环境，提高受精(jing)(jing)(jing)(jing)和发(fa)育的(de)效率；在培(pei)养体(ti)系中添加蛋白质、生(sheng)长因子(zi)和化(hua)学小(xiao)分(fen)子(zi)，以期阐明受精(jing)(jing)(jing)(jing)和胚胎(tai)发(fa)育的(de)机制，提供更加适合受精(jing)(jing)(jing)(jing)和发(fa)育的(de)体(ti)外(wai)条件。这些技术可以简单的(de)归为三类：（1）胚胎(tai)或配子(zi)移植；（2）亚细(xi)(xi)(xi)胞水平(ping)的(de)移植，如(ru)细(xi)(xi)(xi)胞核移植；（3）多能(neng)性细(xi)(xi)(xi)胞分(fen)化(hua)或转(zhuan)分(fen)化(hua)，如(ru)ES或者皮肤细(xi)(xi)(xi)胞分(fen)化(hua)成胚胎(tai)，即(ji)不依赖生(sheng)殖细(xi)(xi)(xi)胞直接在体(ti)外(wai)人造胚胎(tai)。在这些技术中，胚胎(tai)移植，体(ti)外(wai)受精(jing)(jing)(jing)(jing)和单精(jing)(jing)(jing)(jing)注射相对成熟，已经商业化(hua)应用。
年代(dai) | 方法(fa) | 简介 | 应(ying)用(yong) |
1890~ | 胚胎移植（ET） | 同(tong)步化(hua)代孕(yun)受(shou)体的输卵管或(huo)者子宫(gong)移植 | 技术成(cheng)熟，商业化普及 |
1952~ | 细胞核移(yi)植（CNT） | 将胚(pei)胎细(xi)(xi)胞(bao)、ES细(xi)(xi)胞(bao)或体(ti)细(xi)(xi)胞(bao)的(de)核显(xian)微注射到去核的(de)卵母(mu)细(xi)(xi)胞(bao)中 | 研发优化(hua)中， 商业化公司少 |
1959~ | 体外受精（IVF） | 获能的精子与成熟的卵(luan)体外受精 | 技术成熟，商(shang)业化普(pu)及 |
1976~ | 单(dan)精注射（ICSI） | 直接将(jiang)精子或去(qu)尾的(de)精子注(zhu)射到卵(luan)母细(xi)胞中 | 技术成熟，难(nan)度较大，商业化(hua)推广中 |
1992~ | 重组卵(luan)巢移(yi)植（ROT） | 卵(luan)巢组织移植(zhi)；或者原始生殖(zhi)细胞（PGCs）与胚胎期(qi)卵(luan)巢体细胞重(zhong)新聚合在一起；移植(zhi)到受体鼠的卵(luan)巢囊或者肾囊下，重(zhong)组的卵(luan)巢中卵(luan)子形成后(hou)，可以自然交配或者ICSI获(huo)得后(hou)代小鼠 | 研发优(you)化中， 商业化公司少 |
2009~ | 重组睾丸(wan)移植（RTT） | 原始生(sheng)殖(zhi)细胞（PGCs）与胚(pei)胎(tai)期睾(gao)丸体(ti)细胞重新聚合在一(yi)起；移植到受体(ti)鼠的(de)睾(gao)丸囊(nang)，这些重组的(de)睾(gao)丸中(zhong)精子形(xing)成后(hou)，可(ke)以自然交(jiao)配(pei)或者(zhe)ICSI获得(de)后(hou)代(dai)小鼠 | 研(yan)发中(zhong) |
2018 | 人造胚胎 | 3D基(ji)质(zhi)培养，获(huo)得3胚(pei)层特征的(de)胚(pei)胎(tai)样(yang)结构，符(fu)合(he)胚(pei)胎(tai)的(de)特征 | 研发中(zhong) |
