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1. 基(ji)本信息
品系名称：B6-Pdcd1em1(hPdcd1)Vst/Vst
常用名：C57BL/6-PD-1人源化小鼠; PD-1人源化小鼠
背景：C57BL/6NCrl
毛色：黑色
品系建立：
采用CRISPR-Cas9辅助的(de)方(fang)法，将小(xiao)鼠(shu)(shu)程序性死亡(wang)受体1基因（Pdcd1 or PD-1，programmed death 1)）的(de)胞(bao)外区替(ti)换为人源(yuan)的(de)序列(lie)。这样在PD-1人源(yuan)化小(xiao)鼠(shu)(shu)体内，使(shi)用人源(yuan)PD-1抗体抑制(zhi)剂时就(jiu)可以(yi)识别(bie)，进(jin)行相关的(de)药(yao)效或药(yao)物(wu)筛选实验。
图1 PD-1人(ren)源化打(da)靶策略示(shi)意图，将C57BL/6N小(xiao)鼠的PD-1胞外区替换为人(ren)源的序(xu)列。
2. 表型(xing)分析
（1）FACS检(jian)测PD-1人源(yuan)化小鼠脾脏和胸腺淋巴细胞(bao)表达h Pdcd1。
图2 流式分析人PD-1在脾脏和胸(xiong)腺淋(lin)巴细(xi)胞(bao)的表(biao)(biao)达情况。结果(guo)C57BL/6N野生小(xiao)鼠(shu)基本检测不到表(biao)(biao)达，hPD-1小(xiao)鼠(shu)，特别是共刺(ci)激(ji)后（costimulation）hPD-1小(xiao)鼠(shu)的脾脏和胸(xiong)腺淋(lin)巴细(xi)胞(bao)可以(yi)检测到表(biao)(biao)达。
（2）体内药效验证
将PD-1人源(yuan)化小(xiao)鼠皮下(xia)接(jie)种小(xiao)鼠MC38结肠癌细胞系，将动物随机分成(cheng)2组(zu)（n=6，雌雄各半）,对照组(zu)注(zhu)射生理盐水，实验(yan)组(zu)注(zhu)射Keytruda，每周给(ji)药(yao)2次，连续给(ji)药(yao)6次。结果(guo)(guo)显示，雌性和雄性PD-1人源(yuan)化小(xiao)鼠均为理想(xiang)的体(ti)内药(yao)效试验(yan)模型，Keytruda均表现出明显的抑(yi)瘤效果(guo)(guo)。 ;
图3 PD-1人源(yuan)化(hua)(hua)小(xiao)鼠(shu)(shu)模型可以成(cheng)功(gong)应用于抗(kang)PD-1人源(yuan)化(hua)(hua)抗(kang)体效(xiao)果的评价。阳性药(yao)物Keytruda在人源(yuan)化(hua)(hua)PD-1小(xiao)鼠(shu)(shu)上表现出明显的抑(yi)瘤效(xiao)果，而且不存在性别差异（雌性和雄性PD-1人源(yuan)化(hua)(hua)小(xiao)鼠(shu)(shu)），均为理想的体内药(yao)效(xiao)试(shi)验模型。
3. 应用领域
PD-1是一种(zhong)重要的(de)免疫抑制分(fen)子，为CD28超家族成(cheng)员。维通达(da)研(yan)发的(de)PD-1人(ren)源化小鼠，接种(zhong)MC38肿(zhong)瘤(liu)细胞(bao)系后，注(zhu)射PD-1抑制剂Keytruda后，表(biao)现(xian)出明显的(de)肿(zhong)瘤(liu)缩小和(he)消失，可以(yi)用于PD-1相关的(de)药效(xiao)或药物筛选实验。
另外对以PD-1为(wei)靶(ba)点(dian)的(de)免疫调节(jie)对抗肿瘤、抗感染、抗自(zi)身免疫性疾病及器官移植存活(huo)等(deng)均有重要的(de)意义(yi)。
4. 参考文献
（1）Shinohara T, Taniwaki M, Ishida Y, Kawaichi M, Honjo T (October 1994). "Structure and chromosomal localization of the human PD-1 gene (PDCD1)". Genomics. 23 (3): 704–6.
