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URG

1.基(ji)本信息

品系名称:NOD.Cg-Tg(tetO- Alb- uPA)1Deng Rag2tm1VstIl2rgtm1Vst /Vst

常用名:URG®小鼠;Tet-uPATg Rag2null Il2rgnull 小鼠

背景:NOD

毛色:白(bai)色


品系建立:

URG®小鼠,由4种基因修饰动物模型交配获得,包含2个转基因和2个基因敲除。2006年,宋希军等研究人员构建了TRE-uPA 转基因小鼠和Alb-rtTA转基因小鼠,然后交配获得了Alb-rtTA/TRE-uPA双阳性小鼠;通过Dox诱导,在该小鼠中检测到了uPA表达和肝损伤[1]。维通达技术人员将Alb-rtTA/TRE-uPA双阳性小鼠连续8代回交到NRG(NOD背景的Rag2null Il2rgnull小鼠)背景,2012年获得Alb-rtTA/ TRE-uPA/Rag2null/Il2rgnull 小鼠,商品名为URG®小鼠。

作为新一代的可调控肝损伤人源化肝脏小鼠模型[2~6],人源肝脏细胞可以实现20-95%整肝重建。


2. 表型

(1)URG®同NRG(NOD-Rag2null Il2rgnull)小鼠一样,可以常规扩繁,并且可以在任何时间点用Dox诱导肝损伤。

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图(tu)1  URG®小(xiao)(xiao)鼠(shu)肝(gan)损伤分(fen)析。在(zai)不诱(you)导(dao)时(shi),检测(ce)不到(dao)表达(da)uPA表达(da)(C);在(zai)DOX饮水(shui)诱(you)导(dao)后,免(mian)疫(yi)组化可(ke)以检测(ce)到(dao)uPA的表达(da)(D)。uPA表达(da)的肝(gan)脏(zang)呈苍白色(F);野生小(xiao)(xiao)鼠(shu)的肝(gan)脏(zang)是(shi)暗红色(G)。HE染(ran)色可(ke)见URG®小(xiao)(xiao)鼠(shu)肝(gan)细胞空泡(pao)化(H),而对照小(xiao)(xiao)鼠(shu)肝(gan)细胞形态(tai)正常(I)。


(2)URG®人肝脏(zang)细(xi)胞可(ke)以(yi)实(shi)现20%~95%的重(zhong)建,外(wai)周血中(zhong)人ALb逐步升(sheng)高到(dao)毫克级的水平

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图2 URG®小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)人(ren)(ren)肝细(xi)(xi)胞(bao)重建(jian)。(A,B) HE染色证明人(ren)(ren)肝脏(zang)细(xi)(xi)胞(bao)在URG小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)肝脏(zang)中成功(gong)重建(jian),染色浅的(de)部分(fen)为(wei)人(ren)(ren)肝脏(zang)细(xi)(xi)胞(bao);(C)人(ren)(ren)肝细(xi)(xi)胞(bao)移(yi)植后,随着时(shi)间延(yan)长,小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)外周血中人(ren)(ren)血清白蛋白(human albumin)水平逐渐升高(gao)到毫克级水平。


(3)RT-PCR 和免疫组化(Albumin, CK18, CYP3A4)确认(ren)肝(gan)(gan)脏人(ren)源化URG®小鼠(shu)嵌合(he)肝(gan)(gan)中人(ren)特异(yi)标记表达(da)

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图3  人(ren)源化URG®小(xiao)鼠(shu),人(ren)鼠(shu)嵌合鼠(shu)肝(gan)脏RT-PCR分析表达人(ren)特异的基(ji)因(A);和人(ren)Albumin, CK18, CYP3A4免疫组化染色阳性(xing)(B)。


(4)肝脏人源化URG®小鼠HBV感染和HBV核心和C抗原组化染色

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图4  人源(yuan)化URG®小鼠(shu),支(zhi)持人HBV病毒的感染。A,人源(yuan)化URG®小鼠(shu)外周血中,HBV拷贝数的定量RT-PCR分(fen)析;B,HBV表面抗原(yuan)和核心抗原(yuan)染色阳性。


3. 应用领域

-URG® 小鼠和肝脏人源化URG® 小鼠可以用于人特异的肝病、药物安全性评估和人特异的肝脏代谢酶相关的研究

-HBV,HCV感染研究

-药(yao)物(wu)代(dai)(dai)谢与药(yao)代(dai)(dai)动(dong)力学研究

-干细胞研究

-基(ji)因治疗(liao)


4. 参考文献

(1)Xijun Song,Yushan Guo,Shuguang Duo,Jie Che,Chen Wu,Takahiro Ochiya,Mingxiao Ding,Hongkui Deng.A Mouse Model of Inducible Liver Injury Caused by Tet-On Regulated Urokinase for Studies of Hepatocyte Transplantation.The American Journal of Pathology.Volume 175, Issue 5, November 2009, Pages 1975-1983.

(2)Du, Y., Wang, J., Jia, J., Song, N., Xiang, C., Xu, J., Hou, Z., Su, X., Liu, B.,Jiang, T., et al. (2014). Human hepatocytes with drug metabolic function induced from fibroblasts by lineage reprogramming. Cell Stem Cell, 14,394–403.

(3)Azuma, H. et al. Robust expansion of human hepatocytes in Fah-/-/Rag2-/-/Il2rg-/- mice. Nature biotechnology 25, 903-910, doi:10.1038/nbt1326 (2007).

(4)Bissig, K. D. et al. Human liver chimeric mice provide a model for hepatitis B and C virus infection and treatment. The Journal of clinical investigation 120, 924-930, doi:10.1172/JCI40094 (2010).

(5)Xu, D. et al. Chimeric TK-NOG mice: a predictive model for cholestatic human liver toxicity. The Journal of pharmacology and experimental therapeutics 352, 274-280, (2015).

(6)Lander FoquetElizabeth M. WilsonLieven VerhoyeMarkus GrompeGeert Leroux-RoelsJohn BialPhilip Meuleman. Successful Engraftment of Human Hepatocytes in uPA-SCID and FRG® KO Mice.Hepatocyte Transplantation pp 117-130.



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