联系我们Contact us
基本信息
品(pin)系名称：B6.Cg-Tg(tetO- Alb- uPA)1 Vst /Vst
常用名： Tet-uPATg小鼠; Tet-uPA小鼠(shu)
背(bei)景：C57BL/6NCrl
毛(mao)色：黑(hei)色
鉴定方法：黑(hei)色
品系(xi)建立(li)：
Tet-uPA小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)是肝(gan)(gan)脏(zang)特异表达的(de)Alb启(qi)动(dong)(dong)子/增强子驱动(dong)(dong)的(de)rtTA基(ji)因(yin)(yin)和TRE-uPA基(ji)因(yin)(yin)片(pian)段转(zhuan)(zhuan)入小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)建立(li)的(de)Tet-On调控(kong)的(de)uPA转(zhuan)(zhuan)基(ji)因(yin)(yin)小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)，在Dox诱(you)导(dao)下(xia)uPA在肝(gan)(gan)脏(zang)表达，可引起肝(gan)(gan)损(sun)伤（如图1所(suo)示）。维通达建立(li)的(de)Tet-uPA小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)品系是由混(hun)合(he)背景的(de)转(zhuan)(zhuan)基(ji)因(yin)(yin)首建鼠(shu)(shu)与(yu)C57BL/6NCRL小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)回交10代获得的(de)。Tet-uPA小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)的(de)优(you)点是小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)在未(wei)诱(you)导(dao)时呈健康状(zhuang)态，在Dox给药诱(you)导(dao)时才出现肝(gan)(gan)损(sun)伤，而(er)且可以(yi)通过Dox的(de)剂量控(kong)制(zhi)肝(gan)(gan)损(sun)伤程度。
2006年，维(wei)通达(da)研(yan)究(jiu)人员构建了TRE-uPA 转基因小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)(shu)和Alb-rtTA转基因小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)(shu)，然(ran)后交配获得了Alb-rtTA/TRE-uPA双阳(yang)(yang)性小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)(shu)；通过Dox诱导，在该小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)(shu)中检测到(dao)(dao)了uPA表达(da)和肝损伤(shang)[1]。维(wei)通达(da)技(ji)术人员将Alb-rtTA/TRE-uPA双阳(yang)(yang)性小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)(shu)连续8代回交到(dao)(dao)C57BL/6 NCrl，2018年获得Tet-uPA B6小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)(shu)。
模型特征
图1 uPA基(ji)因(yin)在肝细胞(bao)的可(ke)调控表达。
繁育信息
交配方式：纯合(he)扩繁
日粮(liang)信(xin)息：SPF 繁殖(zhi)鼠粮(liang)
平均(jun)产(chan)子数(shu)：6
繁育(yu)周期(周)：32
基因型鉴定信息
基因 | 引物 | 序列(lie)(5’---3’) | 产(chan)物大小 |
uPA | uPA-F | GTCGAGTAGGCGTGTACGGT | 400bp(positive) |
uPA-R | CCATTTCCATGATAGCAGGT | ||
rtTA | rtTA-F | GCTCCAGATGGCAAACATACGC | 640bp(positive) |
rtTA-R | TTCCTCCAATACGCAGCCCAGT |
表型
Tet-uPA B6小(xiao)鼠(shu)，可(ke)(ke)(ke)以(yi)在任何时间用(yong)(yong)Dox诱导(dao)(dao)(dao)肝(gan)(gan)(gan)损(sun)(sun)伤(shang)。此前研究(jiu)发(fa)现，小(xiao)鼠(shu)肝(gan)(gan)(gan)脏特(te)异性(xing)(xing)(xing)过(guo)表(biao)达尿激酶(mei)型纤溶酶(mei)原激活蛋白(bai)(urokinase-type plasminogen activator，uPA)可(ke)(ke)(ke)引起肝(gan)(gan)(gan)细(xi)胞(bao)(bao)坏死，即uPA转(zhuan)(zhuan)基因小(xiao)鼠(shu)可(ke)(ke)(ke)以(yi)作为肝(gan)(gan)(gan)损(sun)(sun)伤(shang)模(mo)型。但(dan)是(shi)(shi)uPA转(zhuan)(zhuan)基因鼠(shu)的(de)(de)(de)缺点是(shi)(shi)死亡率高(gao)，难于繁殖(zhi)。北(bei)京维通达公司开(kai)发(fa)了可(ke)(ke)(ke)调(diao)控(kong)(kong)的(de)(de)(de)更接近生理性(xing)(xing)(xing)条(tiao)件(jian)的(de)(de)(de)肝(gan)(gan)(gan)损(sun)(sun)伤(shang)模(mo)型Tet-uPA转(zhuan)(zhuan)基因小(xiao)鼠(shu)。这种小(xiao)鼠(shu)转(zhuan)(zhuan)入了两个基因片段，一段是(shi)(shi)Alb-rtTA，一段是(shi)(shi)TRE-uPA，构成(cheng)在肝(gan)(gan)(gan)细(xi)胞(bao)(bao)内(nei)特(te)异表(biao)达的(de)(de)(de)Tet-On系统调(diao)控(kong)(kong)的(de)(de)(de)uPA转(zhuan)(zhuan)基因结构。Tet-uPA小(xiao)鼠(shu)在不(bu)诱导(dao)(dao)(dao)的(de)(de)(de)情况下是(shi)(shi)完全健康状态，可(ke)(ke)(ke)以(yi)正(zheng)常(chang)繁殖(zhi)；当用(yong)(yong)四环素类(lei)药(yao)物(wu)Dox诱导(dao)(dao)(dao)时，uPA在肝(gan)(gan)(gan)细(xi)胞(bao)(bao)内(nei)表(biao)达，引起肝(gan)(gan)(gan)损(sun)(sun)伤(shang)。既可(ke)(ke)(ke)以(yi)用(yong)(yong)高(gao)剂(ji)量(liang)Dox诱导(dao)(dao)(dao)产生急性(xing)(xing)(xing)肝(gan)(gan)(gan)损(sun)(sun)伤(shang)甚至肝(gan)(gan)(gan)衰(shuai)竭的(de)(de)(de)表(biao)型，也可(ke)(ke)(ke)以(yi)用(yong)(yong)较低剂(ji)量(liang)持续诱导(dao)(dao)(dao)成(cheng)为慢(man)性(xing)(xing)(xing)肝(gan)(gan)(gan)损(sun)(sun)伤(shang)。在合适的(de)(de)(de)时间窗口诱导(dao)(dao)(dao)uPA表(biao)达，并结合高(gao)脂饮食，Tet-uPA小(xiao)鼠(shu)可(ke)(ke)(ke)以(yi)诱导(dao)(dao)(dao)成(cheng)非(fei)酒精性(xing)(xing)(xing)脂肪变性(xing)(xing)(xing)肝(gan)(gan)(gan)炎（non-alcoholic steatohepatitis, NASH）、肝(gan)(gan)(gan)硬化和肝(gan)(gan)(gan)癌模(mo)型。因而Tet-uPA小(xiao)鼠(shu)是(shi)(shi)肝(gan)(gan)(gan)损(sun)(sun)伤(shang)机理研究(jiu)、保肝(gan)(gan)(gan)药(yao)物(wu)和NASH药(yao)物(wu)药(yao)效(xiao)评价(jia)的(de)(de)(de)理想模(mo)型。
目前业界(jie)认为(wei)最好NASH和肝癌(ai)小(xiao)(xiao)(xiao)鼠模(mo)型是DIAMOND模(mo)型和MUP-uPA模(mo)型，而Tet-uPA比MUP-uPA小(xiao)(xiao)(xiao)鼠更具(ju)优势，因为(wei)MUP-uPA小(xiao)(xiao)(xiao)鼠是在接近(jin)成(cheng)体时(shi)（5、6周龄）表(biao)达uPA，窗口期有一(yi)定限制，而Tet-uPA小(xiao)(xiao)(xiao)鼠可以在任意(yi)时(shi)期诱导(dao)uPA的表(biao)达。
B6.Tet-uPA小鼠注射Dox（100mg/kg）后血清ALT/AST
B6.Tet-uPA诱导(dao)肝损伤(shang)并(bing)HDF饲喂(wei)3个(ge)月，可以诱导(dao)类似于人的NASH模型
天狼猩红染(ran)色 HE染(ran)色
应用领域
1.急慢性肝损伤模型等相(xiang)关(guan)研(yan)究。
2.NASH模(mo)型(xing)、肝癌模(mo)型(xing)、以及药(yao)物(wu)安全性评(ping)估(gu)等(deng)相关研究。
参考文献
1.A Mouse Model of Inducible Liver Injury Caused by Tet-On Regulated Urokinase for Studies of Hepatocyte Transplantation.The American Journal of Pathology.Volume 175, Issue 5, November 2009, Pages 1975-1983.
2.Preclinical Models for Studying NASH-Driven HCC: How Useful Are They?Cell Metabolism 29, January 8, 2019
